羊肚菌母种培养基配方、制作方法及注意事项

　　一、母种的制作
　　1、培养基配方
　　黄豆芽500克(煮汁)，白糖20克，琼脂20克，羊肚菌基脚～50克，水1升。
　　黄豆芽500克(煮汁)，白糖20克，琼脂20克，水1升。
　　栎木屑500克(煮汁)，白糖20克，琼脂20克，水1升。
　　马铃薯200克(煮汁)，白糖20克，琼脂20克，蛋白胨0.5克，牛肉膏0.5克，水1升。
　　蛋白胨1克，葡萄糖20克，琼脂20克，酵母膏1克，磷酸二氢钾1克，硫酸镁1克，维生素B1，1克，水1升。pH值自然。
　　上述配方任选一组。将木屑或豆芽加水1升煮30分钟，过滤取汁，并将余下的水补足1升，加入其它原料，煮至溶化后，按母种制作常规方法，分装于18毫米×180毫米或20毫米×200毫米试管的1/5，塞上棉塞，使用高压灭菌锅彻底灭菌;在0.68千克压力下维持60分钟，自然冷却至指针回到原位才可打开，放成斜面备用。
　　2、伟德ios版官方下载分离
　　(1)分离方法
　　羊肚菌分离需要一种助生菌与羊肚菌菌丝共生时才能出菇，这种助生菌长期活动在土壤中，有时以芽孢菌形式出现，它为羊肚菌的原基形成和子实体生长发育起着至关重要的作用。因此从土壤中分离该菌比其它任何方式分离要好些，初学者可在四川绵阳市伟德开户平台研究所购买培养好的羊肚菌优良母种，并参加现场培训。
　　(2)操作过程
　　在羊肚菌生长的周围，可见白色菌丝充满土壤。从土壤中挑选这种菌丝容易成功。
　　浸提分离法：将基脚土用无菌水稀释，澄清后用接种针蘸取少量溶液，滴到试管内的空白培养基上，塞上棉塞后取出培养。分离后，放在12～18℃温度下培养观察。一旦伟德ios版官方下载分离成功，在以后的转接过程中要小心，不能再让杂菌感染，必须把好高温灭菌关和接种消毒关，才能保证伟德ios版官方下载质量和成活率。
　　3、转接提纯
　　待培养基表面余水干后才能使用，否则会被细菌感染。接种要求在接种箱内通过药物灭菌进行，将第一代纯母种挑取黄豆大一块带菌丝的培养基，放入空白培养基上，每支母种可接10～15支，母种只能扩种一次，不能多接或多扩，否则会影响子实体生长。
　　4、培养
　　接种后放在18～22℃温度下避光培养，2～3天菌丝萌发，7天可长满斜面培养基。
　　二、原种制作
　　1、培养基配方
　　栎木屑50%，棉籽壳30%，麦麸15%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。
　　栎木屑75%，米糠或麦麸20%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。
　　稻草粉70%，麦麸25%，石膏1.5%，过磷酸钙1.5%，土2%，pH值自然。
　　棉籽壳90%，木屑8%，土2%，pH值自然。
　　玉米芯50%，木屑30%，米糠15%，石膏1%，过磷酸钙1%，土3%，pH值自然。
　　2、操作过程
　　按配方将原料混合均匀，加入清水，使含水量达65%时装瓶。装瓶要求松紧一致，装瓶后塞上棉塞封口。
　　3、灭菌
　　高压灭菌在0.68千克压力下维持1小时，常压灭菌在100℃温度下保持6～8小时。
　　4、接种与培养
　　接种在接种箱内经消毒后，每支母种可接种原种5～10瓶。接种后放在18～22℃温度下避光培养，培养期间尽量避免强光刺激，菌龄以不超过50天为好。
　　三、栽培种制作
　　1、培养基配方
　　栎木屑75%，米糠或麦麸20%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。
　　棉籽壳75%，麦麸20%，石膏1%，过磷酸钙1%，土3%，pH值自然。
　　稻草粉75%，麦麸15%，过磷酸钙2%，土3%，pH值自然。
　　玉米芯80%，米糠15%，石膏2%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。
　　农作物藤秆粉75%，米糠10%，麦麸10%，白糖1%，石膏1%，过磷酸钙1%，土2%，pH值自然。
　　2、操作过程
　　按配方将原料混匀后，加水调至含水量为65%，装瓶，灭菌接种，培养，操作方法同上述原种。经1个月菌丝长满瓶后就可用于生产栽培。